Linee guida per le tecniche di disinfezione e sterilizzazione per la sostituzione dei filtri dell'aria ad alta efficienza nelle cabine di biosicurezza

Il processo di disinfezione e sterilizzazione durante la sostituzione dei filtri HEPA/ULPA nelle cabine di biosicurezza è una fase fondamentale della biosicurezza, volta a massimizzare la protezione degli operatori e dell'ambiente durante lo smantellamento dei vecchi filtri che potrebbero essere contaminati da agenti patogeni. Questa guida fornisce procedure operative rigorose e punti tecnici.
principio fondamentale
Considerare l'intero processo di sostituzione come un'operazione di riparazione di un "dispositivo potenzialmente infetto". Tutte le misure tecniche ruotano attorno a "imballaggio, purificazione e protezione" per garantire che gli inquinanti vengano effettivamente eliminati e sigillati durante il processo operativo.

L'obiettivo di questa fase è ridurre il carico biologico all'interno del filtro e della camera, creando le condizioni per uno smontaggio sicuro.

Chiarire il livello di rischio: determinare l'agente patogeno con il livello di rischio più elevato (come i microrganismi BSL-2 o BSL-3) che la cappa di sicurezza ha gestito. Il piano di disinfezione deve corrispondere a questo livello di rischio.
Scegli il disinfettante: scegli un disinfettante ad ampio-spettro, efficiente e compatibile in base al tipo di agente patogeno. Le scelte comuni includono:
Disinfettanti contenenti cloro (come una soluzione di cloro efficace da 1.000-5.000 mg/l appena preparata): hanno un forte potere letale contro batteri, virus e spore fungine, ma sono altamente corrosivi. È importante rimuovere accuratamente i residui dopo il tempo di contatto.
Perossido di idrogeno (come una soluzione di perossido di idrogeno al 3-6% o di tipo composito): ad ampio spettro, a basso residuo, adatto a varie superfici.
Etanolo o isopropanolo al 70%-75%: efficace contro la maggior parte dei batteri e dei virus, ma limitato contro i virus e le spore non avvolti, comunemente utilizzati per la disinfezione preliminare e ausiliaria.
Composti fenolici: diluire e utilizzare secondo le istruzioni.
Determinare il metodo di disinfezione: solitamente combinando "pulizia/infusione di liquidi" e "fumigazione con gas/vapore" per ottenere l'effetto migliore.

Operazione di purificazione: prima della sostituzione pianificata, lasciare che l'armadio di sicurezza funzioni a pieno carico per almeno 30 minuti senza interferenze (per situazioni ad alto-rischio, si consiglia di funzionare per più di 1 ora), utilizzando il flusso d'aria interno per catturare eventuali particelle sospese sul filtro.
Pulizia e disinfezione delle superfici:
Indossare i dispositivi di protezione individuale di base (camici da laboratorio, guanti, occhiali).
Utilizzare un disinfettante adatto (come alcol al 70%) per pulire accuratamente tutte le superfici all'interno dell'armadietto, comprese le pareti interne, i banchi da lavoro, le finestre in vetro, le griglie, ecc., per rimuovere la contaminazione superficiale.
Passaggio fondamentale: disinfezione profonda dell'area di lavoro (metodo di fumigazione - fortemente consigliato)
Questo è il metodo di pre-trattamento più efficace in grado di uccidere i microrganismi che non possono essere catturati dal flusso d'aria e si depositano negli angoli e sulle superfici.
Metodo: Con la premessa di garantire la sicurezza, è possibile utilizzare un generatore "VHP/H2O2" per far circolare la fumigazione all'interno dell'armadio, oppure è possibile utilizzare la fumigazione con formaldeide (a causa di problemi di sicurezza e ambientali, ora è usata raramente e richiede un controllo estremamente rigoroso).
Soluzione alternativa semplificata: se non sono presenti attrezzature professionali, un tessuto non- imbevuto di disinfettante ad alta concentrazione (come il perossido di idrogeno) può essere distribuito uniformemente sulla superficie dell'area di lavoro dopo lo spegnimento e la finestra anteriore deve essere chiusa per mantenere il contatto per almeno 1 ora, creando un ambiente locale di vapore ad alta concentrazione.

L’operatore sostitutivo dovrà indossare:
Indumenti protettivi congiunti (preferibilmente monouso e resistenti ai liquidi).
Guanti a doppio strato (guanti per visita medica strato interno, guanti in nitrile spesso strato esterno).
Maschera protettiva di livello N95 o superiore (quando si maneggiano agenti patogeni ad alto-rischio, è necessario utilizzare un respiratore con filtro e alimentazione d'aria (PAPR)).
Occhiali o visiere integrali.
copriscarpe
Preparare sacchetti per rifiuti a rischio biologico, contenitori di disinfettante e nastro sigillante.

L'obiettivo di questa fase è ottenere "perdite zero" o "minimizzare le perdite" durante lo smantellamento e la rimozione dei vecchi filtri.

Blocco dello spegnimento: dopo aver completato la fumigazione o la disinfezione dei contatti, scollegare completamente l'alimentazione dell'armadio di sicurezza e bloccarlo con un cartellino.
Disinfezione liquida secondaria: dopo che l'operatore ha indossato un set completo di DPI, aprire la finestra anteriore e pulire nuovamente l'area da toccare con disinfettante (come il telaio del filtro, il dispositivo di fissaggio, l'impugnatura dell'utensile).

Questa è la tecnologia fondamentale per impedire la fuoriuscita di sostanze inquinanti.
Preparare un imballaggio a doppio-strato: aprire un sacchetto grande e spesso per rifiuti a rischio biologico nell'area di lavoro dell'armadietto sicuro o adiacente alla sua apertura.
Smontare il dispositivo di fissaggio: rimuovere con attenzione la fascetta di pressione, l'elemento di fissaggio, ecc. del filtro e immergere tutte le piccole parti in un piccolo contenitore contenente disinfettante.
Rimuovere e sigillare immediatamente:
Due persone collaborano, una allenta con attenzione il filtro da un lato e l'altra lo stabilizza.
Far scorrere il vecchio filtro direttamente e senza intoppi nel primo strato preparato di sacchetto per materiali a rischio biologico.
Azione chiave: quando il filtro è entrato completamente nel sacco ma non ha ancora toccato il fondo, assistere il personale nell'avvolgere e stringere immediatamente l'apertura del sacco verso l'alto dall'esterno, riducendo al minimo il disturbo dell'aria all'interno del sacco.
Spruzzare l'apertura del sacchetto con disinfettante, quindi l'operatore principale lega saldamente l'apertura del sacchetto dall'interno con fascette o nastro adesivo.
Sigillatura dello strato esterno: posizionare la busta sigillata del primo strato nella seconda busta per materiali a rischio biologico, spruzzare il disinfettante sull'apertura della busta e legarla saldamente da parte di personale esterno.
Disinfezione delle superfici: spruzzare immediatamente il disinfettante sulla superficie esterna del sacchetto a doppio-strato.

Dopo aver rimosso e sigillato il vecchio filtro, pulire e sciacquare immediatamente con un disinfettante tutti gli spazi interni esposti, come la scanalatura di installazione del filtro, la scatola a pressione statica, la camera della ventola, ecc.
Immergere tutti i pannelli di rivestimento interno smontati, i pannelli diffusori e gli altri componenti nel disinfettante.
Mantenere il disinfettante a contatto con la camera per un tempo sufficiente (solitamente 20-30 minuti).
Pulire con acqua sterile o un panno privo di lanugine imbevuto di acqua pulita per rimuovere i residui di disinfettante (soprattutto disinfettanti corrosivi) e asciugare con un panno pulito o asciugare all'aria in modo naturale.

Utilizza il vecchio filtro sigillato a doppio-strato come rifiuto infetto altamente pericoloso e invialo alla sterilizzazione ad alta-pressione il prima possibile secondo le norme di biosicurezza del laboratorio.
La busta per la sterilizzazione deve essere chiaramente etichettata con la dicitura "Filtro HEPA per rifiuti dell'armadio Biosafety - contaminato".
È severamente vietato smaltirlo o aprirlo come rifiuto ordinario senza sterilizzazione.

Dopo aver confermato che la camera di installazione è stata pulita e asciugata, è possibile installare un nuovo filtro.
Dopo l'installazione, un professionista deve condurre un "test di tenuta con scansione dell'integrità post installazione", che è l'unico criterio per verificare la corretta installazione e il processo di disinfezione senza contaminare il nuovo filtro. Solo dopo aver superato l'ispezione l'armadio di sicurezza potrà essere riattivato.
Principali precauzioni e tabù
Divieto di funzionamento a secco: è severamente vietato smontare e rimuovere direttamente il filtro senza alcun trattamento di disinfezione.
Divieto di utilizzo da parte di una sola persona: due persone devono collaborare, di cui una persona come operatore principale e una persona che assiste nel passaggio degli strumenti e nella sigillatura.
Divieto di protezione insufficiente: in nessun caso gli standard dei DPI devono essere abbassati.
Controllo ambientale: condotto in un'area ben ventilata, preferibilmente all'interno dell'area centrale di un laboratorio di biosicurezza.
Piano di emergenza: preparare un kit per la gestione delle fuoriuscite e chiarire le procedure di risposta alle emergenze in caso di contaminazione accidentale (come la rottura del sacco).
Processo riassuntivo
Valutare i rischi → Selezionare i disinfettanti → Fumigazione/disinfezione all'interno della cabina → Protezione avanzata del personale → Interruzione di corrente → Disinfezione secondaria → Sigillare e rimuovere il vecchio filtro in un sacchetto → Disinfezione finale della camera → Sterilizzazione ad alta pressione del vecchio filtro → Installazione del nuovo filtro → Verifica obbligatoria del rilevamento delle perdite → Registrazione e archiviazione.
Per la stragrande maggioranza dei laboratori, in particolare quelli che si occupano di agenti patogeni BSL-2 e superiori, si consiglia vivamente di esternalizzare questo lavoro a fornitori di servizi di cabine di biosicurezza con una vasta esperienza e attrezzature di disinfezione professionali. Possono fornire procedure operative di sicurezza standardizzate, attrezzature professionali per la fumigazione e sopportare i corrispondenti rischi di biosicurezza, rendendoli una scelta più affidabile e conforme.